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• Al passo
• Parte 1 di 2: controllo della calibrazione
• Parte 2 di 2: calcolo dei risultati

Una pipetta è un tipo di apparecchiatura di laboratorio utilizzata per misurare e trasferire quantità molto piccole di liquido. L'accuratezza e la precisione nella misurazione della pipetta sono necessarie perché qualsiasi deviazione nei volumi erogati può influenzare i risultati di un esperimento. Per garantire l'accuratezza, è necessario controllare la calibrazione della pipetta ogni pochi mesi. Il processo di calibrazione aiuta a verificare che l'apparecchiatura stia erogando i volumi corretti in modo che possa essere ripristinata in caso contrario.

Al passo

Parte 1 di 2: controllo della calibrazione

1. Raccogli i materiali necessari. Per controllare la calibrazione di una pipetta, sono necessari una pipetta, puntali per pipette, acqua distillata, un becher, un termometro, una bilancia e dei piatti. La bilancia deve essere specifica per microgrammi per calibrare le micropipette con un massimo di 1 µl.
   • Non servono più di 5 ml di acqua. Riempi la tazza con l'acqua.
   • Assicurarsi che i puntali delle pipette si adattino correttamente.
2. Misurare la temperatura dell'acqua distillata. Metti il ​​termometro nell'acqua e lascialo riposare per almeno un minuto. Se la linea rossa sul termometro è ancora in movimento, lasciarla per un altro minuto. Dopo un minuto, annota la temperatura su un quaderno. Togli il termometro e asciugalo quando hai finito.
   • La temperatura dell'acqua è importante per i calcoli effettuati per controllare la calibrazione.
3. Posizionare la bilancia sulla bilancia e impostarla a zero. Idealmente, si utilizza una bilancia con porte e una stanza isolata. Posiziona la ciotola nella stanza e chiudi le porte. Se non ci sono porte, posiziona la ciotola sulla bilancia. Premere il pulsante "Zero" o "Tare" e attendere che la bilancia legga lo zero.
   • Impostando la bilancia a zero, il peso della ciotola di plastica non viene preso in considerazione e diventa possibile misurare solo il peso di ciò che si mette nella ciotola.
4. Preparare la pipetta per la calibrazione. Prima di iniziare, pulire la pipetta con etanolo per eliminare eventuali contaminanti; inoltre, assicurarsi che la punta della pipetta non si ostruisca. Posiziona la punta corretta all'estremità e imposta il volume che desideri testare.
   • Prima della calibrazione, testare sia il volume più piccolo che quello più grande che la pipetta può erogare.
5. Lavare la punta prima della calibrazione. Premere il pulsante fino al primo arresto e inserire la punta nell'acqua distillata in modo che circa 2 mm di essa siano immersi nel liquido. Rilasciare il pulsante per aspirare un po 'di liquido, quindi erogare nuovamente il liquido premendo il pulsante verso il basso. Ripeti l'operazione tre volte per lavare la punta.
   • Premere il pulsante fino al secondo arresto per erogare il liquido rimanente nella punta e rimuovere la pipetta dall'acqua.
6. Redigere il volume di calibrazione. Con la punta fuori dal liquido, premere il pulsante fino al primo arresto. Immergere circa 2 mm dalla punta nell'acqua distillata e rilasciare il pulsante per aspirare il liquido nella punta. Attendi circa un secondo prima di rimuovere la punta dall'acqua.
   • Assicurati che la punta sia completamente immersa durante l'intero processo di aspirazione. Non vuoi bolle nella punta o il risultato non sarà corretto.
7. Dosare il liquido nella ciotola sulla bilancia. Posizionare la punta contro il fondo della ciotola e premere il pulsante fino al primo arresto. Spostati in un altro punto, leggermente lontano dall'acqua, e premi il pulsante fino alla seconda fermata. Tieni premuto il pulsante e solleva la punta della ciotola.
   • Tieni la punta sulla pipetta, perché la utilizzerai di nuovo per eseguire più test di calibrazione. Assicurati che la punta non tocchi nulla.
8. Registra il peso che indica la bilancia. Chiudi la porta se stai usando una bilancia in una stanza isolata. Attendi che i valori smettano di cambiare. Registra questo valore nel tuo taccuino.
   • È importante attendere che il numero si stabilizzi prima di scriverlo. Le tue letture saranno sbagliate se non aspetti.
9. Ripeti questo processo fino a quando non hai preso almeno 10 misurazioni. Azzerare la bilancia, sciacquare la punta, aspirare lo stesso volume, erogare il volume e quindi registrare il peso. Hai bisogno di più registrazioni dello stesso volume e poi puoi prendere la media di tutte le registrazioni insieme.
   • È possibile ripetere lo stesso processo con volumi diversi, purché si effettuino più misurazioni per volume.

Parte 2 di 2: calcolo dei risultati

1. Usa la formula per il volume calcolato. La formula per calcolare il volume erogato dalla pipetta è V = w * Z, dove w è il peso dell'acqua, Z è il fattore di conversione basato sulla densità dell'acqua e V è il volume calcolato di quanta acqua ci viene consegnato.
   • Puoi trovare la variabile Z cercando la densità dell'acqua utilizzando la temperatura registrata all'inizio dell'esperimento.
   • Ad esempio: se la temperatura dell'acqua era di 23 ° C, si assume un valore Z di 1,0035 µg / mg.
2. Calcola la media delle prove ripetute. È necessario aver pesato almeno 10 volte il volume di acqua erogata dalla pipetta. Per calcolare la media di tutti questi valori, sommali e dividili per 10. Se hai eseguito più o meno prove, aggiungi ciascuna prova e dividi la somma per il numero totale di prove.
   • Ad esempio: i dieci pesi registrati per un volume di pipetta da 10 µl sono i seguenti: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 e 9,98.
   • La media è: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Applicare le variabili all'equazione e risolverla. Dopo aver determinato i valori corretti per ciascuna variabile, è possibile incorporarli nell'equazione e risolvere il volume calcolato. Per risolvere questo problema, moltiplicare semplicemente il peso medio di tutti i valori del test per il valore Z.
   • Ad esempio: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Calcola la precisione della pipetta. Per calcolare la precisione è possibile utilizzare l'equazione A = 100 x V._avg/ V₀ dove A è la precisione della pipetta, V._avg il volume medio calcolato e V.₀ il valore impostato per la pipetta. La precisione deve essere compresa tra 99 e 101%.
   • Se la pipetta è calibrata correttamente, il valore calcolato dovrebbe essere molto vicino al valore effettivo impostato sulla pipetta.
   • Ad esempio: A = 100 x V_avg/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Questa pipetta è calibrata correttamente.
5. Inviare la pipetta per la calibrazione, se necessario. Se la pipetta non supera il test di calibrazione, smetti immediatamente di utilizzarla per gli esperimenti. Le pipette sono parti molto delicate e costose dell'attrezzatura di laboratorio. Non è possibile riparare da soli la calibrazione, quindi sarà necessario inviarla per una corretta manutenzione. In alternativa, alcune aziende verranno nel tuo laboratorio e calibreranno le tue pipette lì.
   • Per la manutenzione, contattare l'azienda che produce la marca della pipetta specifica.